PS-304 不銹鋼開口直壁容器

蛔蟲卵測(cè)定、沉淀集卵法

容量：10L帶刻度

配套 1ML 網(wǎng)格 浮游生物計(jì)數(shù)框 和 5ML S型 浮游生物計(jì)數(shù)框

沉淀集卵法主要通過樣品濃縮，雜質(zhì)分離，鏡檢計(jì)數(shù)等環(huán)節(jié)對(duì)水中蠕蟲卵進(jìn)行測(cè)定，用60目篩網(wǎng)過濾去除樣品中較大的雜質(zhì)，利用回傳卵比重大于水和易于沉淀的特定特性過夜沉淀濃縮水樣，用虹吸的方法棄去上清液，用表面活性劑吐溫80作為殘液及沉淀轉(zhuǎn)移時(shí)的清洗劑，進(jìn)一步離心濃縮轉(zhuǎn)移的剩余物，收集到的濃縮物用乙酸-乙酸鈉緩沖液混勻控制溶液PH值，獲得最佳親水-親脂平衡，加入乙酸乙酯吸收水中的脂肪類雜質(zhì)使蛔蟲卵更易下沉，再次離心濃縮樣品并棄去上部脂肪雜質(zhì)層及緩沖液層，獲得的含卵沉淀層用飽和硝酸鈉溶液混勻，于計(jì)數(shù)框中靜置漂浮后鏡檢，即可測(cè)得水樣中蛔蟲卵的數(shù)量。

不銹鋼開口直壁容器10L（蛔蟲卵測(cè)定）蛔蟲卵測(cè)定 沉淀集卵法：

蛔蟲卵分受精卵和未受精卵。受精卵呈寬橢圓形?；紫x卵一旦進(jìn)入人體，在它發(fā)育到成熟的整個(gè)過程中都會(huì)給人體造成危害?；紫x卵在土壤、肥料、人體等自然界廣泛存在！防止糞便污染環(huán)境是切斷蛔蟲傳播途徑的重要措施。

　　蛔蟲卵死亡率直接影響肥料的效果，可采用五格三池貯糞法，使糞便中蟲卵大部分沉降在池底。由于糞水中游離氨的作用和厭氧發(fā)酵，蟲卵可被殺滅，同時(shí)也會(huì)增加肥效。在用于糞做肥料的地區(qū)，可采用泥封堆肥法，三天后，糞堆內(nèi)溫度可上升至52℃或更高，可以殺死蛔蟲卵。

　　那么蛔蟲卵死亡率又是如何測(cè)定的呢？依據(jù)GB/T 19524.2—2004如下：將堿性溶液與肥料樣品充分混合，分離蛔蟲卵，然后用密度較蛔蟲卵密度大的溶液為漂浮液，使蛔蟲卵漂浮在溶液的表面，從而收集檢驗(yàn)。

　　1、蛔蟲卵分離

　　稱取5.0～10.0 g樣品（顆粒較大的樣品應(yīng)先進(jìn)行研磨），放于容量為50 mL離心管中，注入NaOH溶液25～30 mL,另加玻璃珠約10粒，用橡皮塞塞緊管口，放置在振蕩器上，靜置30 min后，以200～300 r/ min頻率振蕩10～15 min。振蕩完畢，取下離心管上的橡皮塞，用玻璃棒將離心管中的樣品充分?jǐn)噭?，再次用橡皮塞塞緊管口，靜置15～30 min 后，振蕩10～15 min。

　　2、離心沉淀

　　從振蕩器上取下離心管，拔掉橡皮塞，用滴管吸取蒸餾水，將附著于橡皮塞上和管口內(nèi)壁的樣品沖入管中，以2000～2500 r/ min速度離心3～5 min后，棄去上清液。然后加適量蒸餾水，并用玻璃棒將沉淀物攪起，按上述方法重復(fù)洗滌三次。

　　3、 離心漂浮

　　往離心管中加入少量飽和 NaNO3 溶液，用玻璃棒將沉淀物攪成糊狀后，再徐徐添加飽和 NaNO3 溶液，隨加隨攪，直加到離管口約1 cm為止，用飽和 NaNO3 溶液沖洗玻璃棒，洗液并入離心管中，以2000～2500 r/ min速度離心3～5 min。

　　用金屬絲圈不斷將離心管表層液膜移于盛有半杯蒸餾水的燒杯中，約30次后，適當(dāng)增加一些飽和NaNO3 溶液于離心管中，再次攪拌、離心及移置液膜，如此反復(fù)操作３～４次，直到液膜涂片觀察不到蛔蟲卵為止。

　　4、抽濾鏡檢

　　將燒杯中混合懸液，通過覆以微孔火棉膠濾膜的高爾特曼氏漏斗抽濾。若混合懸液的渾濁度大，可更換濾膜。

　　抽濾完畢，用彎頭鑷子將濾膜從漏斗的濾臺(tái)上小心取下，置于載玻片上，滴加二、三滴甘油溶液，于低倍顯微鏡下對(duì)整張濾膜進(jìn)行觀察和蛔蟲卵計(jì)數(shù)。當(dāng)觀察有蛔蟲卵時(shí)，將含有蛔蟲卵的濾膜進(jìn)行培養(yǎng)。

　　5 、培養(yǎng)

　　在培養(yǎng)皿的底部平鋪一層厚約1 cm 的脫脂棉，脫脂棉上鋪一張直徑與培養(yǎng)皿相適的普通濾紙。為防止霉菌和原生動(dòng)物的繁殖，可加入甲醛溶液或甲醛生理鹽水，以浸透濾紙和脫脂棉為宜。

　　將含蛔蟲卵的濾膜平鋪在濾紙上，培養(yǎng)皿加蓋后置于恒溫培養(yǎng)箱中，在28 ℃～30 ℃ 條件下培養(yǎng)，培養(yǎng)過程中經(jīng)常滴加蒸餾水或甲醛溶液，使濾膜保持潮濕狀態(tài)。

　　6、 鏡檢

　　培養(yǎng)10～15 d ，自培養(yǎng)皿中取出濾膜置于載玻片上，滴加甘油溶液，使其透明后，在低倍鏡下查找蛔蟲卵，然后在高倍鏡下根據(jù)形態(tài)，鑒定卵的死活，并加以計(jì)數(shù)。鏡檢時(shí)若感覺視野的亮度和膜的透明度不夠，可在載玻片上滴一滴蒸餾水，用蓋玻片從濾膜上刮下少許含卵濾渣，與水混合均勻，蓋上蓋玻片進(jìn)行鏡檢。

　　7、 判定

　　凡含有幼蟲的，都認(rèn)為是活卵，未孵化或單細(xì)胞的都判為死卵。

　　8、 結(jié)果計(jì)算

　　式中：

　　K —蛔蟲卵死亡率（%）

　　N1—鏡檢總卵數(shù)

　　N2—培養(yǎng)后鏡檢活卵數(shù)